Prélèvement en Bactériologie
Prélèvement d’urines pour ECBU
Les
prélèvements doivent être réalisés de préférence avant tout traitement
antimicrobien.
Chez la femme :
1.
Se
laver les mains soigneusement à l’eau et au savon, sécher avec une serviette
propre.
2.
Nettoyer
soigneusement la partie vulvaire, de l’eau savonneuse.
3.
Rincer
à l’eau et sécher.
4.
Uriner
en éliminant le premier jet dans les toilettes, recueillir les urines du milieu
de la miction dans le récipient, la fin de la miction doit être faite dans les
toilettes.
5.
Fermer
le récipient soigneusement.
Chez L’homme :
1.
Se
laver les mains soigneusement à l’eau et
au savon et les sécher.
2.
Dégager
le gland, le nettoyer l’eau savonneuse chaude.
3.
Eliminer
le premier jet d’urines dans les toilettes.
4.
Recueillir
les urines du milieu de la miction dans un récipient stérile et renfermer
soigneusement en évitant les contaminations. Terminer la miction dans les toilettes.
Chez l’enfant et le nourrisson :
o
Chez le nourrisson :
1. Préparer une
poche en plastique.
2. Faire boire au
nourrisson autant d’eau que possible juste avant la collecte des urines.
3. Désinfecter au
dakin la zone méatique, ainsi que toute la surface cutanée ou sera placée la
poche.
N.B : Ne jamais laisser la poche en place plus de 30 à 40
min.
o
Chez l’enfant :
-
Faire boire à l’enfant d’eau que possible juste avant
la collecte des urines.
-
Désinfecter au dakin ou à l’eau savonneuse, la zone
méatique.
-
L’enfant peut être assis sur les genoux de sa mère.
-
Recueillir le plus d’urines possible dans un récipient
stérile, le renfermer soigneusement.
Conservation et transport :
Les échantillons d’urines doivent être transportés au
laboratoire dans l’heure qui suit la collecte. Si le transport ne peut pas être
immédiatement assuré, l’échantillon d’urine doit être conservé dans le réfrigérateur et manipulé dans les 24 heures.
Prélèvement d’urines pour le compte d’addis
Prélèvement est effectué le matin.
1. Demander au
malade de vider sa vessie et de boire un grand verre d’eau.
2. Le malade reste
allongé pendant 3 heures.
3. Recueillir la
totalité des urines des 3 heures dans le flacon prévu pour le prélèvement.
Conservation et transport :
Prélèvement doit être rapidement acheminé au laboratoire dans les 4 heures à température ambiante.
Prélèvement des selles pour coproculture
-
De préférence avant toute utilisation d’antibiotiques.
-
L’échantillon doit être prélevé le matin.
-
Les selles doivent être collectées dans un pot
stérile.
-
Fermer le récipient et le transférer au laboratoire.
Ecouvillonnage rectal :
-
Ne doivent être utilisés que si le patient est
incapable de produire un échantillon de selles.
-
Un écouvillon stérile à extrémité en coton, humidifié
avec de l’eau physiologique stérile est introduit au-delà du sphincter rectal,
subi quelques rotations avant d’être retiré et placé dans un tube stérile bien
fermé.
-
Les échantillons de selles soigneusement emballés,
doivent être analysés dans les 2 heures
qui suivent le prélèvement.
Prélèvement génitaux
Les prélèvements génitaux doivent être faits de préférence
avant tout traitement antibiotique, le matin avant la miction ou deux heures
après la miction .
Chez la femme :
Prélèvement vaginal :
1.
Demander à la patiente de faire sa toilette intime la
veille au coucher.
2.
La patiente est placée en position gynécologique.
3.
Mettre en place le spéculum.
4.
A l’aide d’écouvillon en alginate ou en dacron stériles,
prélever les sécrétions au niveau du cul-de-sac postérieur du vagin.
Un premier écouvillon va servir à ensemencer, sur place, le
milieu de culture .Deuxième écouvillon sera adressé pour l’examen direct.
Prélèvement
endocervical :
1.
Placer la patiente en position gynécologique.
2.
Eliminer la glaire cervicale avec du gaz stérile en
utilisant la pince.
3.
Introduire un écouvillon en lui imprimant un mouvement
de rotation pendant au moins dix secondes, avant de le retirer.
4.
Ensemencer directement un milieu de culture approprié.
5.
Un deuxième écouvillon au laboratoire, pour l’examen
direct.
Chez l’homme :
Prélèvement au niveau de
l’urètre :
1. En présence d’un
écoulement visible, la goutte est collectée à l’aide de deux écouvillons. Le
premier est utilisé immédiatement pour la préparation d’un frottis fin et le
second pour l’inoculation d’un milieu de culture.
2. En absence d’un
écoulement visible.
Prélèvement de
sperme :
1. Une abstinence
sexuelle de 3 jours est requise.
2. Effectuer le
prélèvement après une miction suivie d’une désinfection et un rinçage soigneux
du gland.
3. Le sperme est
recueilli, en totalité, dans un tube ou un flacon stérile.
Liquide céphalo-rachidien :
Prélever dans le cadre d’une méningite infectieuse bactérienne,
virale ou parasitaire.
Conservation et transport :
Le transport doit être très rapide et s’il nécessite plus
d’une heure, le prélèvement doit être envoyé au laboratoire à 35°C, jamais au
froid.
Non conformité du prélèvement :
L’échantillon refusé en cas de :
§ Absence
d’étiquette sur le tube.
§ Absence
d’ordonnance.
§ Absence
d’identification du patient, incomplet erronée ou non déchiffrable.
§ Tube non
stérile, ouvert, mal fermé ou cassé.
§ Tube acheminé au
laboratoire à température ambiante plus d’une heure après prélèvement.
§ Tube transporté
au froid.
Liquide péritonéal
Prélèvement :
est effectué avant
toute utilisation d’antibiotiques
Conservation et transport :
Si la durée de transport dépasse une heure, transporter les échantillons dans une caisse isotherme à
2-8°C.
Prélèvement non conforme :
§ Absence
d’étiquette sur le tube.
§ Absence
d’ordonnance.
§ Absence
d’identification du patient, incomplet erronée ou non déchiffrable.
§ Tube non
stérile, ouvert, mal fermé ou cassé.
§ Tube acheminé au
laboratoire à température ambiante plus d’une heure après prélèvement.
§ Tube transporté
au froid.
Prélèvement ORL
Prélèvement au niveau de l’oreille :
Le but de ce prélèvement est le diagnostique étiologique des infections
de l’oreille externe et moyenne par mis en culture aérobie et anaérobie et
étude de la sensibilité aux antibiotiques des germes isolés.
Matériel :
Ecouvillons en coton ou en dacron.
Seringue, aiguille.
Tube stérile.
Piège à vide stérile.
Milieu de transport.
Moment du prélèvement :
Le prélèvement est réalisé avant la prise d’antibiotiques.
Procédure :
Oreille externe :
1.
Installer le patient en position assise.
2.
Utiliser un premier écouvillon humide pour éliminer
les débris et croutes du conduit auditif externe.
3.
Effectuer ensuite le prélèvement à l’aide de 2
écouvillons en appuyant fermement sur les parois de l’oreille. Un écouvillon
servira à l’examen microscopique et l’autre à la mise en culture.
Conservation et transport :
Si les échantillons ne sont pas analysés dans l’heure qui
suit le prélèvement, ils seront transportés, de préférence à +4°C.
Les échantillons peuvent être conservés de deux heures à 20°C
sans milieu de transport et moins de douze heures à 20°C en cas d’utilisation
de milieu de transport.
Non-conformité du prélèvement :
·
Identification absente, erroné ou incomplète.
·
Discordance entre l’ordonnance et le prélèvement
·
Ecouvillon non stérile.
·
Ecouvillon sec.
·
Ecouvillon contenant des débris de croutes du conduit
auditif.
·
Temps et température de transport non respectés.
·
Absence de milieu de transport si l’échantillon est
acheminé au laboratoire plus de 2h après le prélèvement.
Prélèvement de gorge et du rhinopharynx
- Permet de confirmer le diagnostique de pharyngite streptococcique, de diphtérie, d’épiglotite, de stomatite de Vincent et de candidose buccale.
- Permet d’établir le foyer infectieux de la fièvre scarlatine, la fièvre rhumatismale et de la glomérulonéphrite aigue
- Permet d’identifier les porteus de bacilles diphtériques, gonococciques et méningococciques.
Matériel :
- Écouvillons à bouts en coton.
- Abaisse-langue.
- Milieu de transport.
Moment du prélèvement :
Le prélèvement est effectué au cours de le phase aigue de la
maladie et avant tout traitement antibiotique.
Procédure :
Dirigé la lumière de façon à bien éclairer la cavité buccale
et demander au patient d’ouvrir largement sa bouche et de dire AH,
ensuite abaisser doucement la langue du patient avec un abaisse –langue
stérile.
Introduire un écouvillon dans le pharynx au dessus de la
langue. Eviter de toucher les lèvres , le plais et la langue avec
écouvillon.
Gratter fermement l’écouvillon contre l’arrière de la gorge, les deux amygdales et toute
autre zone présentant une inflammation, exsudation ou ulcération.
Conservation et transport :
Si l’écouvillon peut être manipulé dans les deux heures qui
suivent le prélèvement, il faut le placer dans un tube stérile et le fermer
avec un bouchon. Si la manipulation est retardé, placer l’écouvillon dans le
milieu de transport, casser l’extrémité non stérile qui a été en contact avec
les doigts, puis replacer le bouchon.
Non conformité du prélèvement :
·
Identification patient absente, erroné ou incomplète.
·
Absence de bon de demande d’examen.
·
Ecouvillon non stérile.
·
Ecouvillon sec ou ouvert.
·
Ecouvillon contenant des débris de croutes du conduit
auditif.
·
Temps et température de transport non respectés.
·
Absence de milieu de transport si l’échantillon est
acheminé au laboratoire plus de 2h après le prélèvement.
Crachats :
Il ne faut pas examiner des expectorations constituées de
salive et de particules alimentaires.
Le prélèvement est effectué avant l’utilisation
d’antibiotiques, le matin de préférence à jeune.
Procédure :
-
Le patient doit se tenir debout si possible ou assis
en se tenant droit,
-
Le patient doit inspirer profondément pour remplir ses
poumons avec de l’air et expirer en une seule fois, toussant aussi fort et
aussi profondément que possible.
-
Le crachat qui remonte doit être versé dans le pot à
crachats.
-
Une collecte de crachats de 24 heures ou le recueil de
3 échantillons de crachats n’est utile qu’en cas d’infection à mycobactéries.
-
Renfermer le flacon et envoyer l’échantillon
immédiatement au laboratoire.
-
La conservation et le transport se font à 2 – 8 °C
dans une glacière, sauf si la durée du transport est inférieure à une heure.
Prélèvement de pus
Le but de cette analyse est le
diagnostic étiologique des infection purulentes cutanées et viscérales .
Matériel
Solution antiseptique, pinces
stériles, seringues, aiguilles, coton, écouvillons stériles, gazez et des
pansements stériles, milieu de transport.
Le prélèvement droit être réalisé de
préférence avant l’administration d’antibiotiques.
Procédure
Par aspiration :
-
Informer le patient
-
Prendre de la gaze avec une pince, l’imbiber d’alcool
et décontaminer les bords de a lésion. Laisser sécher l’alcool.
-
Introduire l’aiguille dans la zone décontaminée et
aspirer les sérosités en profondeur de la plaie.
-
Déposer quelques gouttes de ces sérosités sur un
écouvillon en coton et les plonger dans le tube de milieu de transport. Le
reste est déposé sur une lame pour la réalisation d’un frottis.
-
Faire un pansement.
Par écouvillonnage :
-
Informer le patient.
-
Oter le pansement avec pince.
-
Prendre de la gaze avec pince, la tremper dans une
solution saline et laver la surface de la lésion ou de l’ulcère.
-
Retirer l’écouvillon de son étui et placer le bout
profondément dans la plaie. Faire attention à ne pas toucher les bords
adjacents.
-
Enlever le bouchon du tube de milieu de transport, y
plonger l’écouvillon et refermer. Si la tige de l’écouvillon est longue, la
casser pour pouvoir refermer le tube.
-
Faire un nouveau pansement.
Conversation et transport :
Si le transport nécessite plus de deux heures, les
prélèvements peuvent être conservés à 2-8°C.
N.B : Les cultures à partir de lésions et ulcères sont fréquemment
contaminées par des bactéries de l’environnement. L’écouvillonnage ne reflète
pas la vraie cause de l’infection. De ce fait, l’aspiration reste la méthode la
plus fiable.
- Absence d’étiquette sur le tube.
- Identification patient absente, erroné ou incomplète.
- Absence de bon de demande d’examen.
- Ecouvillon non stérile.
- Ecouvillon sec ou ouvert.
- Temps et température de transport non respectés.
- Absence de milieu de transport si l’échantillon est acheminé au laboratoire plus de 2h après le prélèvement.
- Discordance entre le bon de demande d’examen et l’étiquette sur l’échantillon.
- Absence de renseignements sur l’endroit ou a été effectué le prélèvement.
- Absence de frottis dur la lame.
- Ecouvillon acheminé au laboratoire à température ambiante plus de 2 heures après le prélèvement.
- Écouvillon acheminé au laboratoire dans les conditions non stériles.
