Le test rapide : détection des antigènes de chlamydiae

Définition :

Le test rapide de détection des antigènes de chlamydiae  conçu pour la détermination qualitative rapide d’antigènes chalmydiens dans le frottis end-cervical de la femme, dans le frottis urétral ou dans les échantillons d’urine de l’homme.

Principe :

 Test immunochromatographique rapide

Procédure :

Échantillons endocervicaux ou urétraux

              1.       Ajouter au tube à extraction 8 gouttes de la solution d’extraction

              2.       Ajouter 3 gouttes du mélange dans le creux de l’échantillon de la cassette de test. Lire le résultat dans les 15 min.

3.       Fermer le tube d’extraction

4.       Presser cet écouvillon ou cette brosse contre les parois du tube

5.       Ajouter 8 gouttes de solution d’extraction B et mélanger

             6.       Tremper l’écouvillon du patient et extraire pendant 2 min

Échantillons urinaires

           1.       Centrifuger l’urine (minimum 15 mL) pendant 10 min à 10 000 tours/min.

           2.       Verser le surnageant et ajouter 8 gouttes de solution d’extraction A au tube, re-suspendre le pellet à l’aide d’une pipette à sens unique et incuber pendant 2 min à température ambiante.

          3.       Transférer la suspension à l’aide d’une pipette à sens unique, ajouter 8 gouttes de solution d’extraction B et mélanger. Ajouter 3 gouttes et lire le résultat dans les 15 min.

Résultats :

Négative : une ligne colorée n’apparait que dans la zone de la bande de contrôle. Aucun ligne rouge n’apparait dans la zone de la ligne  de test .cela signifie qu’aucun antigène de chlamydiae n’a été détecté ou la quantité d’antigène chlamydiae doit se trouver sous le seuil de détection.

Positif : En plus de la ligne de contrôle, une ligne rouge apparaît dans la zone de test. Cela signifie que l’échantillon comporte des antigènes de chlamydiae.

Invalide : si aucune ligne de control n’apparait, test n’est pas valable. Cela signifie qu’une erreur s’est produite pendant le test. Le test doit être recommencé avec une nouvelle cassette de test. Pour cela, il faut prélever un nouvel échantillon ou utiliser un échantillon du mélange d’extraction restant.

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Liquide synovial : Définition

Définition :

Liquide synovial, ou synovie, correspond au liquide qui se trouve au niveau des espaces articulaires. A la fois transparent et visqueux, le liquide synovial ressemble à la texture du blanc d'œuf cru. Son principal rôle est d'assurer la lubrification des articulations. Il sert également à nourrir le cartilage. Généralement disponible en petite quantité au sein d'une articulation, il arrive qu'il soit produit en excès. C'est ce que l'on appelle un épanchement de synovie. Une ponction du liquide synovial peut alors être pratiquée.

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Scotch test anal (test de graham):

Le but: Recherché des œufs d’oxyures.

Procédure :

1.      Se réalise le matin avant la toilette et la défécation.

2.      Appliquer autour de l’anus du patient la face adhésive d’un petit ruban de scotch.

3.      Coller le scotch sur une lame port objet.

4.      Examiner au microscope.

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La réaction de Waaler-Rose

Définition :
La réaction de Waaler-Rose est une très ancienne méthode, appelé également réaction d'hémagglutination, est un examen de laboratoire qui a pour but de mettre en évidence, et de doser, le facteur rhumatoïde dans le sang.

généralité :

 Le facteur rhumatoïde est un auto-anticorps, c’est-à-dire un anticorps dirigé contre les propres tissus d’un individu.

La présence de cet auto-anticorps dans le sang se caractérise par la survenue d’une maladie rhumatismale, le plus souvent la polyarthrite rhumatoïde, mais également la spondylarthrite ankylosante, le lupus, et la dermato-myosite.
Il utilise des globules rouges sensibilisés par des anticorps , qui vont s’agglutiner en présence du facteur rhumatoïde.
Il est positif à partir d’une dilution à 1/64, il est un peu moins sensible que la réaction au latex .

épidémiologie :

La réaction de Waaler-Rose est peu spécifique.

En effet, elle est positive chez environ 1 à 2 % de la population,  alors que ces sujets ne sont pas atteints d’une quelconque maladie.

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TECHNIQUES DE CONCENTRATION DES SELLES : M.I.F concentration :

I-Techniques bi-phasiques (physico-chimique):

1-M.I.F concentration 

Le but :

Cette technique permet d'augmenter la sensibilité de la recherche de formes kystiques ou d'œufs.
Les formes végétatives ne peuvent plus être mises en évidence après concentration.

 Matériels et réactifs :

     ·        Centrifugeuse

     ·        Microscope : objectifs 10 x 40 Flacon ou grand tube

     ·        Applicateur en bois ou anse

     ·        Passoire ou gaze

     ·        Entonnoir

     ·        Tubes coniques à centrifuger gradués (au moins 15 ml)

     ·        Bouchons ou parafilm

     ·        Lames et lamelles

     ·      Crayon marqueur. 

Procédure : 

1.     Mélanger dans un flacon bien bouché une partie de selles pour 10 parties de solution MIF

2.     Bien agiter

3.      Faire un examen direct : prendre une goutte de la solution obtenue après mélange et examiner entre lame et lamelle.

4.      Si l’examen direct est négatif

5.      Mélanger a nouveau en agitant le flacon

6.      Laisser décanter

7.     Verser le surnageant dans un tube à centrifuger.

8.     Ajouter l’éther sulfurique (1/3) en prenant la précaution de laisser au moins un centimètre de hauteur vide dans le tube.

9.      Agiter vigoureusement jusqu'à émulsion complète après avoir bouché le tube avec le pouce

10. Laisser décanter 2 min environ. L’émulsion doit rester stable.

11. Centrifuger immédiatement après l’émulsion pendant une minute à 2000 t.

12. Jeter le surnageant et prélever le culot par capillarité avec une pipette pasteur.  

        Si après deux minutes de décantation l’émulsion instable (présence d’éther surnageant) il faudra ajouter un ml d’eau du robinet agiter et laisser décanter.  Cette opération pourra être répéter autant de fois que l’on constatera la présence d’éther surnageant.

 

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I-Techniques bi-phasiques (physico-chimique): Méthode de ritchie modifiée

I-Techniques bi-phasiques (physico-chimique):

2-Méthode de ritchie modifiée :

Le but :

Concentre bien  les kystes de protozoaires ainsi que les œufs d’ascaris et de schistosomes.

Matériels et réactifs :

•      Solution de formol à 10%
•      L’éther
•      Centrifugeur
•      D'une passoire
•      Pipette pasteur

Procédure :

1.      Diluer une noisette de selles dans une solution de formol à 10%  (100 mL de formol, 9g de NaCl, 900 mL d'eau distillée)

2.      tamiser à l’aide d’une passoire avec des pores fins
laisser sédimenter quelques secondes
Ajouter de

3.       (inflammable) : d'éther au 1/3

4.      agiter vigoureusement jusqu’à l’obtention d’une solution homogène
Centrifuger 2 min à 1500 tr/min, obtient 3 couches :

·  une couche aqueuse

·  une couche épaisse contient les défies

·  une couche éthérée jaunâtre

5.      Rejeter  le surnageant brusquement

6.      Récupérer à l’aide d’une pipette pasteur le culot puis l’examiner.

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II-Concentration biologique :1-Technique de Baermann:

II-Concentration biologique :

1-Technique de Baermann:

Le but : Mise en évidence des larves d’anguillules 

C’est une excellente technique pour la recherche des larves d’anguillules en mettant à profit l’hydrothermo-tropisme positif de ces dernières.

Matériels et réactifs : 

  Ø  Un entonnoir

   Ø  Tubulure porte un tube en caoutchouc

Ø  Une pince

Ø  Une passoire métallique

Ø  L’eau chaude

Ø  Centrifugeuse

Ø  Une boite de pétri

Procédure :

1.      Elle utilise un appareillage simple constitué par un entonnoir de 12cm d’ouverture et dont la tubulure porte un tube en caoutchouc fermé par une pince.

2.      Mettre environ 15g de selles fraiches dans une passoire métallique tapissée selon la consistance de la selle par une ou deux couches de gaze.

3.      Remplir l’entonnoir jusqu’au 1/3 de la hauteur avec de l’eau chaude (environ 45°).

4.      Placer dans l’entonnoir la passoire contenant les selles dont la partie inférieure doit affleurer l’eau.

5.      2 à 3 heures plus tard retirer du dispositif le liquide qui pourra être soit centrifugé à 1500 t/mn pendant 5 minutes et permettre l’examen  du culot au microscope, soit vidé dans une boite de pétri et examiné à la loupe binoculaire.

Quelque fois d’autres parasites peuvent être observés : jeunes oxyures, trichomonas, miracidium de schistosomes.

N.B : Les larves d’anguillule étant contaminants cette technique doit être pratiquée avec le maximum de sécurité (port de gants en particulier).

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II-Concentration biologique : Technique de concentration des parasites dans le sang

II-Concentration biologique :

Technique de concentration des parasites dans le sang :

Matériels et réactifs :

Ø  L’eau du robinet

Ø  Le méthanol (May-Grunwald)

Ø  Solution de Giemsa

Ø  Une lame

Ø  Microscope

Procédure :

La goutte épaisse : il s’agit d’une microtechnique d’enrichissement qui permet d’observer sur une petite surface beaucoup plus de sang que sur un frottis.

Ø  Déposer une goutte de sang au centre de la lame

Ø  Tourner régulièrement dans la goutte tout en l’étalant, pendant deux minutes, à l’aide de la pointe d’un vaccinostyle ou le coin d’une lame pour défibriner  le sang.

Ø  Mettre la lame à l’arbi des poussières et des mouches pendant 4 à 24 heures selon la température ou mettre à l’étuve à 28-40°C pendant 5 minutes.

Ø  Plonger la lame pendant 5 à 10 minutes dans un verre à pied contenant de l’eau du robinet jusqu’à ce que la préparation soit claire (hémolyse complète).

Ø  Retirer la lame et laisser sécher à plat.

Ø  Fixer par le méthanol

Ø  Colorer par une solution de Giemsa pendant 20minutes.

Ø  Rincer à l’eau, laisser sécher et examiner à l’immersion.

Remarques : une technique plus simple consiste à recouvrir la lame de Giemsa dilué à raison d’une goutte par ml, laisser agir pendant 1 heur, laver à l’eau et sécher.La coloration rapide à l’aide du coffret RAL 555 peut être utilisée.

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II-Concentration biologique : 3-Techniques de concentration des parasites dans les urines

II-Concentration biologique :

3-Techniques de concentration des parasites dans les urines :

Sédimentation :

1.      Laisser sédimenter les urines

2.      Prélever 20 ml dans le fond du flacon.

3.      Centrifuger à faible vitesse dans un tube conique

4.      Prélever 1 ml du culot de centrifugation et le verser dans un verre de montre

5.      Examiner la préparation à la loupe ou entre lame et lamelle à faible grossissement.

Concentration :

1.      Agiter le flacon de prélèvement.

2.      Prélever 10 ml d’urine dans le fond du flacon et le verser dans un tube de centrifugation.

3.      Centrifuger pendant 2 minutes à 2000 tours par minute.

4.      Prélever le culot à l’aide d’une pipette pasteur, le verser dans un verre de montre.

5.      Examiner la préparation à la loupe ou entre lame et lamelle à faible grossissement.

6.      Lorsque l’examen est différé, les urines doivent être conservées en ajoutant 5 ml d’un liquide conservateur.

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TECHNIQUES DE CONCENTRATION DES SELLES

TECHNIQUES DE CONCENTRATION DES SELLES 

I-Techniques bi-phasiques (physico-chimique):

1-M.I.F concentration 

2-Méthode de ritchie modifiée :

II-Concentration biologique :

1-Technique de Baermann:

2-Technique de concentration des parasites dans le sang :

3-Techniques de concentration des parasites dans les urines :

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ASLO

Définition :

ASLO ou anticorps anti-streptolysines O (o pour oxygène labile) sont produit en réponse à une infection à streptocoque beta hémolytiques du groupe A (qui secret la streptolysine O )

ces infection variées en passant par l'impétigo.la streptolysine lyse la membrane des globule rouges et elle est antigénique suscitant la formation d'anticorps dénommés anti-streptolysines O.

Ce test permet de déterminer si la personne a été récemment victime d’une infection à streptocoque bêta-hémolytique du groupe A et donc aide au diagnostic de possibles complications, principalement un rhumatisme articulaire ou une glomérulonéphrite.

dosage de l'ASLO :

Pour déterminer si une personne a été récemment victime d’une infection à une bactérie appelée streptocoque bêta-hémolytique du groupe A (ou Streptococcus pyogenes ou S.pyogenes), on va rechercher des anticorps spécifiques dirigés contre la streptolysine O. Ces anticorps sont produits par l’organisme pour lutter contre la bactérie. Ces anticorps peuvent être détectés par des analyses sanguines, c’est le dosage des ASLO.
résultats normaux :

Le seuil de positivité est fixé à 200 U ASLO/ml.

• Titre < 200 U ASLO /ml : non significatif d'une infection streptococcique
• Titre > 200 U ASLO /ml : significatif d'une infection streptococcique

Les ASLO apparaissent environ 10 jours après une infection aiguë, maximum vers le 30 ^ème jour, taux résiduel après 6 mois. Un deuxième dosage après traitement antibiotique peut permettre d'apprécier l'efficacité du traitement (diminution des taux).

variations physiologiques :

Dans 20 % des cas d'infections à Streptocoques A, les taux d'ASLO sont normaux. Le dosage d'un autre type d'anticorps antistreptococciques (ASD, ASK) peut alors permettre ce diagnostic.

interprétation :

Un taux élevé d’anticorps ASLO signifie que le patient souffre peut-être d’une complication post-streptococcique. Le test sera reproduit 10 à 14 jours plus tard pour confirmer les résultats. Deux résultats négatifs signifient que les symptômes ne sont pas liés à une infection streptococcique. Si les résultats montrent que le taux ASLO augmente, l’infection est probablement récente. Si les taux diminuent, cela signifie qu’une infection s’est produite et qu’elle est probablement guérie. La positivité des tests ne permet pas de prédire s’il y aura des complications, ni de déterminer le type ou la gravité de la maladie.

Les informations données sur cette article ne sauraient engager l’auteur et ne sont données qu’à titre informatif. Aussi, consultez un professionnel de la santé pour toute question concernant l'ASLO

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La Glycémie

définition :

La glycémie est le taux de glucose dans le sang, ou plus exactement dans le plasma sanguin. Elle est mesurée en général en millimoles de glucose par litre de sang, en milligramme de glucose par décilitre de sang, ou encore en gramme de glucose par litre de sang.

La régulation de la glycémie est un système de régulation complexe, mettant en œuvre des hormones (dont les deux antagonistes insuline, hypoglycémiante, et glucagon, hyperglycémiant) ainsi que divers organes(pancréas, foie, rein).

Mesure de la glycémie :

au laboratoire d'analyses médicales Les tube de prélèvements de sang pour analyse de la glycémie  contiennent généralement un inhibiteur de la glycolyse ( inhibe la dégradation ou la lyse de glucose)  à base de fluorure de sodium et d'oxalate de potassium.

le dosage du glucose est réalisé complètement par des automates ou semi-manuelle. 

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HÉMOGLOBINE

L'hémoglobine est une molécule de protéine présente dans les globules rouges et qui a pour rôle de transporter l'oxygène des poumons vers les tissus du corps et le gaz carbonique des tissus vers les poumons.

L’hémoglobine est composée de quatre molécules de protéines, appelées globulines, qui sont reliées entre elles.

La molécule d’hémoglobine adulte normale (HBG) est composée de deux chaînes alpha-globulines et deux chaînes bêta-globulines. Chez les fœtus et les nourrissons, les chaînes bêta ne sont pas présentes, la molécule d’hémoglobine est juste constituée de deux chaînes alpha et de deux chaînes gamma. Pendant la croissance de l’enfant, les chaînes gamma sont progressivement remplacées par des chaînes bêta, formant ainsi une structure d'hémoglobine adulte.

Chaque chaîne de globulines contient une importante structure centrale appelée la molécule hème. Cette molécule hème contient du fer qui est vital dans le transport de l'oxygène et du dioxyde de carbone dans le sang. Le fer contenu dans l'hémoglobine est également responsable de la couleur rouge caractéristique du sang.

L'hémoglobine joue également un rôle important dans le maintien de la forme des globules rouges. Dans leur forme naturelle, les globules rouges sont ronds avec un centre assez petit, ressemblant à un donuts sans le trou au milieu. Une structure anormale de l'hémoglobine peut donc influer sur la forme des globules rouges et entraver leur fonction et leur flux à travers les vaisseaux sanguins.

Mesure de l’hémoglobine

L'hémoglobine est généralement mesurée en tant que partie intégrante de la formule sanguine.

Il existe plusieurs méthodes de mesure de l'hémoglobine, dont la plupart sont faites aujourd’hui par des machines spécialement conçues pour effectuer les tests sanguins.

Dans la machine, les globules rouges sont décomposés afin d’obtenir de l'hémoglobine en solution. L'hémoglobine libre est mélangée à une substance chimique contenant du cyanure qui se lie alors fermement avec sa molécule pour former ce qu’on appelle « la cyanométhémoglobine ». La quantité d'hémoglobine peut être déterminée par l’intermédiaire d’une lumière projetée à travers la solution et de la mesure de la quantité de lumière absorbée par la molécule (en particulier sur une longueur d’onde de 540 nanomètres).

Valeurs normales d’hémoglobine

Le taux d’hémoglobine est exprimé en grammes par décilitre (g/dL).

Le taux normal d’hémoglobine dépend de l'âge et, à partir de l'adolescence, du sexe de la personne. Les valeurs normales sont les suivantes :

• Nouveau-né : 17 à 22 g / dL
• Bébé d’une semaine : 15 à 20 g / dL
• Bébé d’un mois : 11 à 15gm/dL
• Enfant : 11 à 13 g / dl
• Adulte homme : 14 à 18 g / dL
• Adulte femme : 12 à 16 g / dl
• Homme d'âge mûr : de 12,4 à 14,9 g / dl
• Femme d'âge mûr : de 11,7 à 13,8 g / dl

Toutes ces valeurs peuvent varier légèrement selon les laboratoires. Certains laboratoires ne font pas de distinction entre les valeurs d'hémoglobine des adultes et des personnes d’âge mur.

Taux/Valeur d’hémoglobine faible

Un faible taux d'hémoglobine est appelé « anémie »

 quelques causes courantes qui peuvent entraîner l’anémie :

• Perte de sang (blessure traumatique, chirurgie, saignements, cancer du côlon, ulcère de l’estomac)
• Carence nutritionnelle (Fer, Vitamine B12, Acide folique)
• Problèmes de moelle osseuse (remplacement de la moelle osseuse à cause d’un cancer)
• Suppression par les médicaments de chimiothérapie
• Insuffisance rénale
• Une structure anormale de l’hémoglobine suite à une drépanocytose ou à une thalassémie

Taux/Valeur d’hémoglobine élevée

Un taux d’hémoglobine élevé peut être observé chez les personnes qui vivent en haute altitude ou encore les fumeurs. La déshydratation entraîne également un taux faussement élevé d’hémoglobine qui disparaît lorsque l’équilibre d’hydratation est revenu à la normale.

Hémoglobine et la thalassémie

La thalassémie désigne un groupe de maladies héréditaires caractérisées par une carence en hémoglobine. L’incapacité du corps à fabriquer des molécules de globuline saines mène alors à un mécanisme de compensation afin de fabriquer d'autres molécules de globuline moins compatibles.

Les différents types de thalassémie sont définis en fonction du type de molécule immunoglobuline qui est déficiente. La sévérité de la maladie dépend du type de chaînes de globuline déficientes, du nombre de globulines déficientes ainsi que la gravité de la sous-production. Une déficience moyenne peut se présenter comme une anémie bénigne, mais une déficience sévère est mortelle.

Analyse médicale :

-Test d'NFS ou numération de formule sanguin

-Test d’hémoglobine A1c ou HbA1c 

HbA1c ou hémoglobine glycosylée est une indication approximative de contrôle de la glycémie chez les personnes atteintes de diabète sucré au cours des trois derniers mois. Comme plus de glucose (sucre dans le sang)circule quotidiennement dans le sang, plus de molécules d’hémoglobine sont liées avec ce glucose.

Taux normal d' HbA1c

Un taux normal HbA1c est compris entre 4 % et 5,9 %. Si ce taux atteint les 6 % ou plus, cela signifie alors que le diabète est mal contrôlé.

Le taux à 6% HbA1c correspond à peu près au niveau moyen de sucre dans le sang, qui est d’environ 135 mg/dL (milligrammes par décilitre) sur les trois derniers mois. À partir de 6 %, chaque augmentation de 1% en HbA1c représente une augmentation du taux moyen de glycémie d'environ 35 mg/dL. Par exemple, un taux HbA1c de 7% correspond à 170 mg/dL de sucre dans le sang sur les trois derniers mois.

Les informations données sur cette article ne sauraient engager l’auteur et ne sont données qu’à titre informatif. Aussi, consultez un professionnel de la santé pour toute question concernant l'hémoglobine.

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